科研产出
基于转录组测序技术分析猪德尔塔冠状病毒诱导IPEC-J2细胞中自噬相关的变化
《中国兽医科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为了探究猪德尔塔冠状病毒（PDCoV）感染宿主细胞后诱导细胞中发生的自噬相关变化，建立了PDCoV感染IPEC-J2细胞模型，通过间接免疫荧光和荧光定量PCR试验确定PDCoV在细胞中显著增殖。利用转录组测序获得了IPEC-J2细胞感染模型和正常细胞中的全部表达基因15 393个。通过基因覆盖度和测序饱和度分析明确数据符合分析要求后，进一步筛选了PDCoV感染导致表达量发生显著变化的基因（差异基因）2 056个，其中自噬相关基因33个。采用荧光定量PCR方法检测12个自噬基因在细胞感染模型和正常细胞中的相对表达量，检测结果与高通量测序结果一致。通过GO功能和KEGG通路富集分析，明确差异基因主要富集的功能和信号通路，并重点展示了6条自噬相关信号通路。本研究初步展示了PDCoV在IPEC-J2细胞增殖过程中诱导细胞发生的自噬相关变化，为研究PDCoV通过诱导细胞自噬促进自身复制的分子机制提供了理论依据。
关键词： 猪德尔塔冠状病毒 IPEC-J2细胞 转录组测序 细胞自噬 病毒复制
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地顶孢霉培养物对奶牛生产性能、乳品质和经济效益的影响
《中国饲料 》 2023 北大核心
摘要：为研究日粮中添加地顶孢霉培养物（ATC）对奶牛生产性能、乳品质和经济效益的影响，试验选择300头健康状况良好的泌乳牛，随机分为对照组和试验组，每组150头牛。对照组饲喂基础日粮，试验组饲喂基础日粮+30g/（头·d）地顶孢霉培养物。预试期5 d，正试期90 d。结果显示：（1）试验组1～30、31～60 d干物质采食量极显著高于对照组（P ＜0.01）,1～90 d干物质采食量高于对照组（P＞ 0.05）;（2）90 d时，试验组校正奶量、群内级别指数（WHI）均高于对照组（P＞ 0.05）；正试期内，试验组高峰奶量比对照组高0.23%（P＞ 0.05），高峰日比对照组提前0.38d;（3）90 d时，试验组乳脂率比对照组高3.87%（P＞ 0.05）;30、60、90 d时，试验组乳蛋白率均高于对照组，分别高2.75%（P ＜0.01）、1.82%（P ＜0.05）、0.29%（P ＜0.01）;90 d时，试验组体细胞数比对照组低4.54%（P＞ 0.05）;30 d时，试验组尿素氮比对照组高7.13%（P ＜0.05）;60 d时，试验组尿素氮比对照组高9.28%（P ＜0.01）;90 d时，试验组尿素氮比对照组低0.98%（P＞ 0.05）;（4）30、60、90 d时，试验组奶损失、经济损失均低于对照组（P＞ 0.05）。综上所述，在日粮中添加30 g/（头·d）地顶孢霉培养物能够在一定程度上提高奶牛干物质采食量，提高泌乳性能和乳品质，降低奶损失和经济损失，从而间接提高经济效益。
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12%精喹禾灵·乙羧氟草醚·甲咪唑烟酸微乳剂在花生中的残留行为评价
《农药 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]建立同时检测花生中乙羧氟草醚、甲咪唑烟酸、喹禾灵及其代谢物的分析方法，并评价农药残留安全性。[方法]样品经酸化乙腈提取，以优化QuEChERS方法净化，采用超高效液相色谱串联质谱仪，多反应监测模式测定，基质匹配外标法定量。[结果]乙羧氟草醚、甲咪唑烟酸、喹禾灵和喹禾灵酸的定量限在0.01～0.05 mg/kg之间；在0.01～1 mg/kg的添加质量分数范围内，各农药的添加回收率在80%～94%之间，且相对标准偏差均低于10%。在0.001～1.5 mg/L的质量浓度范围内，乙羧氟草醚、甲咪唑烟酸、喹禾灵和喹禾灵酸的线性相关性良好，相关系数均大于0.99。12%精喹禾灵·乙羧氟草醚·甲咪唑烟酸微乳剂，以180 g a.i/hm2于花生苗后早期用药1次，成熟期花生中各农药的残留量均低于其定量限，风险商（RQ）小于1。[结论]该方法操作简单、高效、稳定性好，可同时快速检测花生中多种农药的残留量，通过规范残留试验中值计算可知，各农药膳食风险均不会对一般人群健康产生不可接受的风险。
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‘北斗75’青萝卜杂交种纯度SSR分子标记鉴定
《分子植物育种 》 2023 北大核心
摘要：品种纯度是衡量种子质量的关键指标之一。为高效、准确鉴定‘北斗75’青萝卜杂交种纯度，本研究筛选确定了一个条带清晰、多态性高的引物P26，在‘北斗75’青萝卜亲本及F1代间有共显性差异，并进一步利用引物P26对‘北斗75’青萝卜杂交种纯度进行鉴定。结果表明，与形态学鉴定进行比较，两种鉴定方法结果偏差≤2.00%，其方差分析显示两种方法差异不显著；纯度鉴定结果显示，所有样品种子纯度结果均>98%，说明该引物对于‘北斗75’青萝卜杂交种的纯度鉴定方法稳定可靠；利用该引物对13个青萝卜商品种进行检测，结果在其他品种中扩增出不同的条带，说明引物P26具有很高的特异性，可以特异性区分‘北斗75’青萝卜商品种，具有一定的研究价值。
关键词： ‘北斗75’青萝卜 纯度鉴定 形态鉴定 SSR分子标记
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荷斯坦牛与弗*荷F1代牛血液生理生化及乳品质的比较研究
《家畜生态学报 》 2023 北大核心
摘要：为探究荷斯坦牛及弗莱维赫牛×荷斯坦牛杂交后代在血液生理生化及乳品质上的差异，选择48头1胎荷斯坦泌乳牛和27头1胎杂交F1代泌乳牛进行乳品质分析；根据体况、泌乳天数相近的原则，从上述牛只中选择处于泌乳中期的荷斯坦牛和F1代牛各8头，采集血液用于生理生化指标分析。结果表明：（1）F1代牛血液TP、ALB、GLB、GLU、CHOL、NEFA、BHBA均高于荷斯坦牛，分别高10.91%、3.93%、17.86%、11.62%、2.05%、53.85%、1.92%,但差异均不显著（P＞0.05）;F1代牛血液A/G、BUN含量低于荷斯坦牛，分别低12.75%、1.46%,差异均不显著（P＞0.05）;F1代牛血液INS、COR、T3、T4、T3/T4均高于荷斯坦牛，分别高4.47%、102.98%、2.26%、3.98%、13.33%,差异均不显著（P＞0.05）,表明在血液生理生化方面，F1代牛代谢能力及免疫力在一定程度上高于荷斯坦牛。（2）荷斯坦牛乳脂率为3.44%,乳蛋白率为3.36%,体细胞数为18.70×10~4/mL,尿素氮含量为13.03 mg/dL,F1代牛乳脂率为3.49%,乳蛋白率为3.53%,体细胞数为13.69×10~4/mL,尿素氮含量为12.16 mg/dL。F1代牛乳脂率、乳蛋白率较荷斯坦牛高1.45%、5.06%,体细胞数、尿素氮含量较荷斯坦牛低26.79%、6.68%,差异均不显著（P＞0.05）,表明F1代牛乳品质优于荷斯坦牛。综上，在相同饲养条件下，与荷斯坦牛相比，弗莱维赫牛与荷斯坦牛的杂种后代在血液代谢、免疫及乳品质方面具有一定优势。
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昆虫死亡素thanatin与斑点叉尾鮰β-防御素在毕赤酵母中的表达及其抑菌效果评价
《畜牧与兽医 》 2023 北大核心
摘要：旨在利用毕赤酵母表达系统表达出具有良好抑菌效果的重组抗菌肽。选定昆虫死亡素thanatin基因和斑点叉尾鮰β-防御素基因（命名为defbl）,按毕赤酵母偏好性密码子优化后，将用T2A剪切肽连接的共表达基因（命名为TD）及各单基因分别构建至pMD19-T载体上，经EcoRⅠ、SalⅠ双酶切后亚克隆至表达载体pPICZɑA上，经SacⅠ线性化后电转化至毕赤酵母GS115感受态细胞中，通过Zeocin抗性及PCR筛选出阳性菌株，利用1%甲醇进行诱导表达，72 h后收集培养基上清液，冻干浓缩并纯化后，进行Western blot检测及体外抑菌试验、溶血性试验。结果显示，成功构建重组毕赤酵母工程菌株GS115-pPICZαA-thanatin、GS115-pPICZαA-defbl和GS115-pPICZαA-TD,通过甲醇诱导成功获得重组蛋白，纯化后Western blot检测结果显示，thanatin组和defbl组分别在2.3 kDa和7.8 kDa处出现特异性条带，TD组同时出现上述2条带，蛋白大小均与预期相符；3个重组蛋白浓度分别为600、300和700μg/mL;体外抑菌试验及溶血性试验结果显示，各重组蛋白均具有良好的抑菌作用，TD重组蛋白抑菌效果最佳，且所获蛋白均具有较低溶血性。研究表明，利用酵母表达系统成功获得具有良好抑菌效果且溶血性低的重组抗菌肽，相较之下，TD组抗菌肽抑菌效果最佳。本研究结果为后续进一步探索上述抗菌肽的功能及临床应用奠定基础。
关键词： 死亡素thanatin 斑点叉尾鮰β-防御素 抑菌效果 溶血性试验
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天津地区梨小食心虫发生动态监测及特征研究
《中国果树 》 2023 北大核心
摘要：为明确天津地区梨小食心虫发生动态且精准指导绿色防控该蛀果害虫，利用梨小食心虫性信息素诱捕监测技术，连续3年对天津地区梨小食心虫不同寄主雄成虫发生动态进行监测。结果表明：天津地区梨小食心虫越冬代雄成虫始见蛾日期范围为3月20日至4月8日，以3月26日至4月5日较为集中；雄成虫每年出现5个高峰期，不同寄主果园的高峰期基本一致，分别为4月上旬至中旬、5月下旬至6月初、6月下旬至7月上旬、7月下旬至8月上旬、8月下旬至9月上旬；梨小食心虫各代雄成虫羽化高峰期经历时间分别为越冬代至第1代43.0 d、第1代至第2代33.8 d、第2代至第3代26.2 d、第3代至第4代29.4 d。监测结果对科学指导梨小食心虫精准绿色防控及提高梨小食心虫预测预报水平具有重要意义。
关键词： 天津地区 梨小食心虫 发生动态 始见蛾日期 羽化高峰期
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基于等位基因特异性PCR技术检测Sw-5b基因
《天津农业科学 》 2023
摘要：番茄斑萎病毒（Tomato spotted wilt virus, TSWV）是世界范围内危害最大的病毒病之一。为了加快番茄抗TSWV育种进程，利用等位基因特异性PCR（Allele-Specific PCR,AS-PCR）技术建立了与TSWV抗性基因Sw-5b连锁的标记。结果表明：在63°C退火温度下，引入A-C错配的特异性引物rg3-F可以检测出抗性基因型。没有引入错配的特异性引物sg1-F，在60℃退火温度下可以检测出感病基因型。在验证试验中，利用引物Sw5b-f1/r1进行PCR扩增并测序，结果表明利用rg3-F和sg1-F进行AS-PCR，能够有效区分番茄的不同基因型。本研究建立的AS-PCR方法为育种工作者在番茄抗TSWV育种中筛选Sw-5b抗性基因提供了有力的工具。
关键词： 等位基因特异性PCR SNP 番茄 TSWV
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天津市烟粉虱隐种鉴定及其携带TYLCV、内共生菌情况和抗药性监测
《植物保护学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为明确天津市烟粉虱Bemisia tabaci隐种的类别及其寄主适应性、传毒能力、携带内共生菌情况和抗药性，采用mt COI酶切法对从武清、西青、蓟州和宁河4个区的番茄、黄瓜及辣椒3种寄主上采集的12个烟粉虱种群进行隐种鉴定，采用PCR检测其携带番茄黄化曲叶病毒（tomato yellow leaf curl virus,TYLCV）和内共生菌情况，并采用浸叶法测定其对4种常用药剂的抗性。结果表明，采集的烟粉虱种群以MED隐种为主，占所有检测个体的93.33%，有3个种群为MED和MEAM1隐种混合发生。所有检测个体中有36.25%的个体携带TYLCV，在6个种群中检测到TYLCV，其中5个种群有超过50%的个体携带TYLCV。在12个种群中共检测到Hamiltonella、立克次氏体Rickettsia、Cardinium和杀雄菌属Arsenophnus共4种内共生菌，携带个体比例分别为90.63%、48.96%、43.75%和8.33%，进一步对内共生菌协同感染情况进行分析，发现有HARC、HRC、HAC、HR、HC和AC共6个协同感染型，感染率分别为4.17%、28.13%、3.13%、14.58%、5.21%和1.04%。阿维菌素对天津市烟粉虱种群的毒力普遍较高，LC50介于0.05～0.66 mg/L之间，噻虫嗪的毒力则普遍较低，LC50介于267.63～2 998.80 mg/L之间。4种药剂对其中9个种群的毒力顺序为阿维菌素＞溴氰虫酰胺＞吡虫啉＞噻虫嗪，对另外3个种群的毒力顺序为阿维菌素＞吡虫啉＞溴氰虫酰胺＞噻虫嗪。
关键词： 烟粉虱 隐种 番茄黄化曲叶病毒（TYLCV） 内共生菌 抗药性
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