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基于等位基因特异性PCR技术检测Sw-5b基因

文献类型: 中文期刊

作者: 刘文明 1 ; 华明艳 1 ; 宋兰芳 1 ; 崔少杰 1 ; 孙海波 1 ; 金凤媚 1 ;

作者机构: 1.天津市农业科学院

关键词: 等位基因特异性PCR;SNP;番茄;TSWV

期刊名称: 天津农业科学

ISSN: 1006-6500

年卷期: 2023 年 004 期

页码: 1-7

摘要: 番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus, TSWV)是世界范围内危害最大的病毒病之一。为了加快番茄抗TSWV育种进程,利用等位基因特异性PCR(Allele-Specific PCR,AS-PCR)技术建立了与TSWV抗性基因Sw-5b连锁的标记。结果表明:在63°C退火温度下,引入A-C错配的特异性引物rg3-F可以检测出抗性基因型。没有引入错配的特异性引物sg1-F,在60℃退火温度下可以检测出感病基因型。在验证试验中,利用引物Sw5b-f1/r1进行PCR扩增并测序,结果表明利用rg3-F和sg1-F进行AS-PCR,能够有效区分番茄的不同基因型。本研究建立的AS-PCR方法为育种工作者在番茄抗TSWV育种中筛选Sw-5b抗性基因提供了有力的工具。

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