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高丹草SRAP-PCR反应体系优化及验证

文献类型: 中文期刊

作者: 石悦 1 ; 刘拴成 1 ; 房永雨 2 ; 丁海君 2 ; 吕二锁 2 ; 路玉红 3 ;

作者机构: 1.集宁师范学院生命科学与技术学院

2.内蒙古自治区农牧业科学院草原研究所

3.敖汉旗四家子镇农业技术推广站

关键词: 高丹草;SRAP-PCR;正交试验设计;体系优化;验证

期刊名称: 北方农业学报

ISSN: 2096-1197

年卷期: 2022 年 50 卷 001 期

页码: 93-100

摘要: [目的]筛选高丹草SRAP-PCR反应的最佳体系.[方法]采用单因素和正交试验设计相结合的方法,对影响高丹草SRAP-PCR反应体系的5个因素(dNTP、DNA、引物、Taq DNA聚合酶、Mg2+)进行优化;并对高丹草SRAP-PCR优化体系进行验证.[结果]高丹草SRAP-PCR的最佳反应体系为:dNTP浓度275μmol/L、模板DNA浓度3.0 ng/μL、引物浓度1.1μmol/L、Taq DNA聚合酶用量1.00 U、Mg2+浓度2.25 mmol/L,用ddH2O补足至20μL.[结论]筛选出的SRAP-PCR最佳体系扩增条带数目多、多态性丰富、重复性好.

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