文献类型： 中文期刊

作者： 夏树立 ¹ ; 韩静 ¹ ; 王丽学 ² ; 杨春蕾 ¹ ; 刘长悦 ³ ; 王海亮 ⁴ ; 吴贶 ⁵ ; 史慧玲 ¹ ;

作者机构： 1.天津市农业科学院畜牧兽医研究所

2.天津市农业科学院信息研究所

3.天津市农业科学院科润黄瓜研究所

4.天津市现代农业科技创新基地管理中心

5.天津市农业科学院

关键词： 辣椒高赖氨酸基因;枯草芽孢杆菌;基因克隆;同源交换;HPLC

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2020 年 030 期

页码： 98-105

收录情况： CSCD

摘要： 为了选育一种非抗性、高产出、遗传稳定性好、低生产成本的L-赖氨酸生产菌株,以辣椒花药和枯草芽孢杆菌为试验材料,以穿梭表达载体pHT43和基因敲除载体pK18mobsacB为媒介,将辣椒花药中的高赖氨酸基因CFLR转化到枯草芽孢杆菌中.经过2次细胞内同源交换和培养基筛选,最终获得不带质粒抗性标记的高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌株CMCC(B)63501/pK18mobsacB-ΔALA::CFLR,该菌株连续传代20次后仍具有明显高于野生型的CFLR基因拷贝数,经HPLC验证,重组菌株L-赖氨酸含量比野生菌株提高了64.89%.结果表明,本研究所构建的非抗性高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌株产量高、遗传稳定性好、低纯化成本,具有良好的应用潜力.