文献类型: 中文期刊
作者: 黎明国 1 ; 李清春 1 ; 陈鑫 1 ; 卢世豪 1 ; 何凡 1 ; 祁梦凡 1 ; 张化鹏 1 ; 任玉军 1 ; 张庆泽 1 ; 符彬彬 1 ; 徐梦思 1 ; 艾子凯 1 ; 闫坤 1 ; 冯赟 1 ; 华再东 2 ; 黄涛 1 ; 毕延震 2 ;
作者机构: 1.石河子大学动物科技学院
2.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室
关键词: 猪卵母细胞;TET去甲基化酶;甲基化;纺锤体;活性氧;线粒体膜电位
期刊名称: 中国畜牧兽医
ISSN: 1671-7236
年卷期: 2023 年 005 期
页码: 1907-1917
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 【目的】研究TET(ten-eleven translocation)去甲基化酶对猪卵母细胞发育的影响。【方法】将收集的猪卵丘-卵母细胞复合体(COCs)置于不同浓度(0(对照组)、100、200和400μmol/L)Bobcat339抑制剂的体外成熟培养液中培养42 h,测量卵丘扩展直径,统计成熟率,确定最小有效浓度。在体外成熟培养液中培养27 h后,利用免疫荧光(IF)检测5-甲基胞嘧啶(5mC)与5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)信号强度以及纺锤体组装情况;利用DCFH-DA染料检测卵母细胞活性氧(ROS)水平;利用JC-1染色法检测线粒体膜电位水平(MMP);利用ATP检测试剂检测卵母细胞ATP水平;利用实时荧光定量PCR检测42 h时COCs卵丘扩展相关基因表达水平和27 h时卵母细胞抗氧化相关基因表达水平。【结果】与对照组相比,100、200和400μmol/L组卵丘细胞扩展水平均极显著降低(P<0.01),100、200和400μmol/L组成熟率显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),确定最小有效浓度为100μmol/L,后续试验均用该浓度。IF检测结果显示,与对照组相比,27 h时100μmol/L组卵母细胞中5mC信号强度显著升高(P<0.05),而5hmC信号强度没有显著降低(P>0.05)。与对照组相比,27 h时100μmol/L组卵母细胞纺锤体排列紊乱,组装异常。与对照组相比,ROS水平极显著升高(P<0.01),MMP和ATP水平极显著降低(P<0.01)。与对照组相比,42 h时100μmol/L组COCs中卵丘扩展相关基因透明质酸合成酶2(Has2)表达水平显著降低(P<0.05),穿透素3(Ptx3)基因表达量极显著降低(P<0.01),27 h时100μmol/L组卵母细胞中抗氧化相关基因超氧化物歧化酶1(Sod1)与Sod2表达水平显著降低(P<0.05)。【结论】TET去甲基化酶通过清除猪卵母细胞中的5mC,降低ROS水平,提高MMP水平来指导纺锤体正常组装排列,维持COCs的正常扩展,保证猪卵母细胞正常成熟。
- 相关文献
[1]影响猪卵母细胞体外成熟的因素. 李俊,田永祥,曹斌云. 2004
[2]影响猪卵母细胞体外成熟的因素. 李俊,田永祥,曹斌云. 2004
[3]猪卵母细胞回收方法对其体外成熟及体外受精的影响. 田永祥,刘西梅,李莉,郑新民,肖红卫. 2009
[4]采用真空泵法快速获取猪卵母细胞. 肖红卫,郑新民,刘西梅,乔宪凤,李莉,张立苹,华文君,毕延震,华再东,周荆荣. 2011
[5]LHRH-A3及EGF对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响. 刘西梅,张立苹,乔宪凤,李莉,肖红卫,华文君,魏庆信,程妮. 2010
[6]成熟液中不同添加物对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响. 张立苹,王亚刚,李莉,刘西梅,乔宪凤,许生成. 2009
[7]套皿法在猪卵母细胞体外成熟培养中的应用. 李俊,田永祥,曹斌云,谷习文,郑新民. 2004
[8]影响猪卵母细胞胞质内单精子注射效果的因素. 张立苹,刘西梅,李莉,肖红卫,乔宪凤,郑新民. 2012
[9]利用渗透压研究猪卵母细胞发育过程中核迁移规律. 肖红卫,华再东,张立苹,李莉,刘西梅,任红艳,华文君,毕延震,郑新民. 2016
[10]DNA甲基化、组蛋白修饰与基因沉默. 索效军,张年. 2007
[11]组蛋白H3K4me3甲基化修饰与哺乳动物早期胚胎发育. 张立苹,林郑云,华再东,郑新民,毕延震. 2019
[12]猪卵母细胞不同孤雌激活方法的研究. 李莉,郑新民,华再东,刘西梅,毕延震,肖红卫. 2012
[13]体外生产猪原核期胚胎的初探. 肖红卫,周荆荣,郑新民,刘西梅,乔宪凤,李莉. 2012
作者其他论文 更多>>
-
FADS1基因对猪不饱和脂肪酸含量的影响研究
作者:张天天;华再东;任红艳;顾浩;周彬;毕延震
关键词:FASD1基因;过表达;脂肪酸;ω-3;ω-6
-
RNA甲基化修饰在脂肪形成中的研究进展
作者:任祖凤;顾浩;毕延震
关键词:RNA甲基化;N~6-甲基腺嘌呤(m~6A);脂肪生成;酶系统;功能
-
PLINs基因对脂质的调控及其潜在的育种价值研究进展
作者:李志敏;陈洪波;毕延震
关键词:周脂素蛋白家族;脂解;脂质合成;脂滴;分子育种
-
靶向猪睾丸支持细胞PPP1CC基因siRNA的筛选与研究
作者:张燕迪;顾涛涛;方桂杰;任红艳;毕延震
关键词:PPP1CC;siRNA;基因表达
-
高原鸡蛋营养成分分析及评价
作者:黄涛;赵庆军;张宏林;胡庆松;张昊;李刚;皮劲松;梁振华
关键词:高原;鸡蛋;成分
-
农湖2号蛋鸭配套系选育研究
作者:吴艳;皮劲松;梁振华;杜金平;张昊;潘爱銮;申杰;蒲跃进;孙静;黄涛
关键词:农湖2号;青壳;蛋鸭配套系;笼养
-
碱基编辑的研究进展
作者:王晶;朱喆;毕延震;张鹏
关键词:CRISPR/Cas9;碱基编辑技术;胞嘧啶碱基编辑器;腺嘌呤碱基编辑器;分子育种