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丁酸梭菌介导mTOR信号通路调控猪肠上皮细胞炎症反应的分子机制

文献类型: 中文期刊

作者: 李玉鹏 1 ; 李海花 2 ; 郭晓飞 1 ; 姚大为 1 ; 李义海 1 ; 冯婧 1 ; 张金龙 1 ; 张效生 1 ;

作者机构: 1.天津市农业科学院畜牧兽医研究所

2.天津农学院动物科学与动物医学学院

关键词: 猪肠上皮细胞;丁酸梭菌;产肠毒素大肠杆菌K88;mTOR信号通路;肠道健康

期刊名称: 中国饲料

ISSN: 1004-3314

年卷期: 2021 年 023 期

页码: 24-29

收录情况: 北大核心

摘要: 本试验旨在研究丁酸梭菌(CB)介导雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路调控产肠毒素大肠杆菌K88(ETEC K88)感染猪肠上皮细胞(IPEC-J2)炎症反应的分子机制。按试验步骤处理细胞,利用1×103cfu/mL的ETEC K88感染IPEC-J2以及400 nmol/L的mTOR抑制剂处理IPEC-J2,到达作用时间后,分别收集细胞及培养上清,然后按照猪肿瘤坏死因子(TNF-α)和猪白细胞介素-8(IL-8)检测试剂盒说明书进行细胞因子检测,以及使用荧光定量PCR(qPCR)法进行ZO-1、occludin和mTOR表达量的检测。结果表明:与ETEC组相比,抑制剂+ETEC组、CB+ETEC组和抑制剂+CB+ETEC组ZO-1和occludin的表达量均显著升高,或有升高趋势,ZO-1的表达量分别升高了86.59%、31.48%和133.98%,occludin的表达量分别升高了69.34%、18.63%和87.52%,而mTOR的表达量分别降低了40.81%、11.62%和52.43%。与CB+ETEC组相比,抑制剂+CB+ETEC组在mTOR活性被抑制后ZO-1和occludin的表达量极显著升高了77.97%和58.07%,而mTOR的表达量极显著降低了46.18%,CB与抑制剂协同逆转ETEC造成的紧密连接蛋白表达下降。综上所述,ETEC K88能够激活mTOR信号通路,而CB通过介导mTOR信号通路能够降低ETEC K88感染IPEC-J2引起的炎症反应,并提高紧密连接蛋白的表达量,从而减轻细胞损伤。

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