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奶山羊心脏型脂肪酸结合蛋白(FABP3)基因启动子的克隆及活性分析

文献类型: 中文期刊

作者: 姚大为 1 ; 赵欣 2 ; 赵淑颖 3 ; 杨春蕾 1 ; 李玉鹏 1 ; 马毅 1 ;

作者机构: 1.天津市农业科学院畜牧兽医研究所

2.南开大学生命科学学院

3.天津农学院动物科学与动物医学学院

关键词: 心脏型脂肪酸结合蛋白(FABP3);启动子;基因克隆;西农萨能奶山羊

期刊名称: 中国饲料

ISSN:

年卷期: 2021 年 017 期

页码: 10-15

收录情况: 北大核心

摘要: 心脏型脂肪酸结合蛋白(FABP3)是一种15 kDa的蛋白,涉及信号转导途径,参与长链脂肪酸的摄取及利用。本研究采用PCR技术扩增FABP3启动子序列,通过缺失分析构建了5个不同缺失片段荧光素酶报告基因载体,并转染奶山羊乳腺上皮细胞,通过双荧光素酶报告基因系统检测FABP3缺失片段启动子活性。结果表明:从奶山羊基因组中克隆得到2109 bp FABP3基因启动子序列(包括转录起始位点上游1985 bp),与牛(KJ649748.1)、猪(HM591296.1)和人(NG047049.1)的基因组序列同源性分别为90%、80%、75.08%。经转录因子在线软件预测分析发现,该启动子含有潜在的TATA框(TATA-box)、过氧化物酶增殖物激活受体反应元件(PPRE)、肝X受体反应元件(LXRE)、雌激素受体(ER)及两个环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)的结合位点,分别位于-1632 bp和-189 bp。缺失突变研究发现,启动子片段-1801~+124活性最高,同时这一片段含有两个CREB结合位点,而当缺失至-80位点时,活性显著下降(P <0.05),且这一片段不包含CREB结合位点。表明CREB可能参与调控FABP3基因启动子的活性,为FABP3基因的转录调控研究提供理论依据。

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