科研产出
番木瓜WRKY转录因子CpWRKY11的克隆和表达
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]克隆番木瓜炭疽菌诱导的WRKY转录因子CpWRKY11,研究其在生物胁迫、外源激素处理及非生物胁迫条件下的表达特征,为CpWRKY11基因在后续番木瓜分子育种中的应用提供理论支持.[方法]从自主选育的炭疽病抗性品种中克隆WRKY转录因子CpWRKY11,采用SMART、ExPaSy、NetPhos和DNAMAN软件对该基因及其编码的蛋白序列进行生物信息学分析,利用MEGA-X软件进行系统进化树构建和分析;构建亚细胞定位载体CpWRKY11-GFP,通过转化水稻原生质体,确定CpWRKY11的亚细胞定位情况;利用酵母单杂交试验验证CpWRKY11是否具有转录激活活性;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析CpWRKY11在番木瓜不同组织(根、茎、叶、花和果实)及生物胁迫(短孢炭疽菌和番木瓜畸形花叶病毒侵染)、外源激素(水杨酸(SA)、茉莉酸甲酯(Me-JA)、乙烯利(ETH))和非生物胁迫(高盐、干旱和机械损伤)处理下的表达情况.[结果]Cp WRKY11基因编码序列全长1 719 bp,编码572个氨基酸;CpWRKY11含有60个磷酸化位点,理论分子量为62.31 ku,理论等电点为6.75,不稳定指数为51.17,亲水性为-0.792,是一个亲水不稳定蛋白.CpWRKY11有2个典型的WRKY结构域,同源氨基酸比对及进化树分析结果显示,CpWRKY11与拟南芥AtWRKY20的同源性最高,属于WRKY家族I类.亚细胞定位结果显示,CpWRKY11只定位在细胞核上.酵母转录激活验证试验结果显示,CpWRKY11蛋白不具有转录激活活性.CpWRKY11在番木瓜中为组成型表达,在茎中表达量最高,其次为根、果实和花,在叶中的表达量最低.CpWRKY11受短孢炭疽菌和PLDMV的诱导上调表达,在短抱炭疽菌诱导48 h内持续上调,与0 h对照相比其表达量均显著上调,且在反应后期(24和48 h)表达量更高.在PLDMV处理条件下,除接种第3天外,CpWRKY11也均呈现出明显的上调趋势.外源激素处理结果显示,CpWRKY11受SA、ETH和MeJA的诱导上调表达,尤其是在Me-JA处理下,CpWRKY11被强烈诱导而显著上调表达,处理48 h内的表达量较对照上调1.9倍以上.CpWRKY11受机械损伤的强烈诱导,表达量显著上调.[结论]CpWRKY11是调控番木瓜逆境胁迫响应,尤其是病原菌侵染及机械损伤响应的重要因子.CpWRKY11可能主要通过JA信号途径参与病原菌应答反应,是具有潜在利用价值的重要候选基因.
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山药新品种白莳药16的选育
《中国蔬菜 》 2023 北大核心
摘要：白莳药16是由浙江省台州市传统山药产区的特色品种白莳药变异株经过系统选育而成的山药新品种。生育期180d（天）左右，分枝数3～8个；叶片卵形，革质；单株结薯1～2个，无零余子；块茎圆柱形，平均长32.9 cm，直径11.3cm，表皮棕黄色，肉淡黄色，单株块茎质量1.6 kg左右；淀粉含量142 g·kg-1，可溶性糖含量38 g·kg-1，块茎蒸煮口感细腻带糯、有甜味，食味较好；田间对炭疽病的抗性强于对照白莳药，平均产量2 300 kg·（667 m2）-1左右，适宜在浙江省台州及气候相似地区种植。
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双香豆素诱导斜纹夜蛾卵巢细胞程序性死亡的机理研究
《植物保护 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为探索双香豆素(dicoumarin,DIC)抑制斜纹夜蛾Spodoptera litura卵巢细胞SL-221增殖及作用机制,首先,采用CCK-8法测定双香豆素等21个酚类化合物对SL-221细胞的毒性;其次,通过倒置显微镜观察4μg/mL双香豆素处理细胞48 h后其形态变化,并结合流式细胞术研究双香豆素对SL-221的细胞周期、线粒体膜电位及凋亡的影响;最后,通过实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)探索磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/雷帕霉素靶蛋白(target of rapamycin,TOR)营养信号通路的下游关键基因的表达变化.结果表明,21个酚类化合物中双香豆素对SI--221细胞的增殖抑制活性最显著,且呈现明显的浓度依赖性,其48 h的IC50为0.85 μg/mL,对细胞的增殖抑制活性是阳性对照印楝素(IC50为7.20 μg/mL)的8.47倍.4 μg/mL双香豆素处理SL-221细胞48 h后,显微镜下可见细胞肿胀、膜破裂及大量凋亡小体;流式细胞术分析发现,双香豆素处理48 h,SL-221的细胞周期被阻滞在G2/M期,同时线粒体膜电位相比0 h下降99.62%,细胞凋亡,且凋亡率与处理时间呈正相关.RT-qPCR检测发现,双香豆素可显著下调营养信号通路(PI3K/TOR)上的关键基因SL-PI 3K和SL-TOR的表达,同时诱导自噬标志基因SL-Atg8及凋亡指示基因SL-Cytochrome C和SL-P53上调表达,且抑制抗凋亡基因SL-Bcl-2的表达.综上,双香豆素对斜纹夜蛾卵巢细胞具有优异的抑制增殖活性,同时阻断细胞周期并通过抑制营养信号途径(PI3K/TOR)诱导细胞程序性死亡,该化合物具备开发成为新型植物源杀虫剂的潜力.
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利用高密度遗传图谱定位水稻耐低氧萌发QTL
《广东农业科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]耐低氧萌发能力是水稻直播适应性的核心性状之一.采用直播型温带粳稻品种Francis和多穗型优质恢复系R998 衍生的重组自交系群体开展水稻耐低氧萌发QTL定位研究,旨在为直播稻品种培育提供新的有价值的基因资源,促进直播稻新品种培育和直播稻生产方式的推广.[方法]以 28℃淹水 10 cm 暗培养 7 d 的水稻胚芽鞘长、芽长和最大根长作为耐低氧萌发能力指标,通过低倍基因组重测序构建含有 3106 个bin标记的高密度遗传图谱,采用WinQTL Cart 2.5 进行QTL扫描.[结果]低氧萌发条件下,Francis的胚芽鞘长度和根长显著高于R998,但是两者芽长差异不显著.构建的遗传图谱总图距为 3646.2 cM,其中 12 号染色体标记数最少,1 号染色体标记数最多,分别为 174 个和 389 个.遗传图谱的标记平均图距为 1.21 cM,各染色体的平均图距范围为 0.68~1.84 cM,5 cM以上的Gap比例为 0.36%.采用复合区间作图法(CIM),共检测到分布于 5 条染色体上的 6 个耐低氧萌发相关QTL.其中,控制胚芽鞘长度、芽长和根长的QTL个数分别为 3、1、2 个.表型贡献率超过 10%的 2 个QTL是胚芽鞘长度位点qCL9 和芽长位点qSL5,二者分别解释群体表型变异的 13.39%和 10.78%.qCL9 与根长QTL qRL2-1 的增效等位基因均来自亲本Francis,其余 4 个QTL的增效等位基因来自亲本R998.6 个QTL中有 3 个暂未见报道,可能是新的QTL.[结论]Francis和R998 低氧萌发特性存在显著差异,双亲中均含有耐低氧萌发的增效等位基因.qCL9 和qSL5 是分别影响胚芽鞘长和芽长的主效QTL,在直播稻分子育种中具有潜在应用价值.
关键词： 直播稻 重组自交系(RIL) 淹水萌发 QTL 低氧 胚芽鞘
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干热后处理前后花香型乌龙茶的品质比较
《现代食品科技 》 2023 北大核心
摘要：为了研发乌龙茶新产品并提升产品品质，比较分析了干热后处理前后花香型乌龙茶的生化成分和挥发性成分。结果表明：干热后处理后，聚酯型儿茶素A含量显著降低；茶黄素-3’-没食子酸酯、聚酯型儿茶素B和聚酯型儿茶素C含量显著增加；“花香”重要贡献成分二氢芳樟醇的含量在干热后处理前后差异不显著，“蜜香”风味成分2-戊基-呋喃、（E）-2-（2-戊烯基）呋喃、2-乙酰基吡咯增加。基于35种差异挥发性成分的主成分分析表明，干热后处理后，香气类型并未改变，但香气轮廓更清晰。高含量的萜醇类和酯类是的“花香”风味主要赋香成分，2-戊基-呋喃（OAV＞1）对形成“蜜香”有重要贡献。综上所述：干热后处理后的乌龙茶产品滋味醇厚，花香浓郁度降低，蜜韵增加。因此，干热后处理有利于新型乌龙茶品质提升，为后续产品研发提供新思路和新方法。
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蓝莓花青素的提取及其抗氧化活性和稳定性
《食品研究与开发 》 2023 北大核心
摘要：该文采用4种不同溶剂（无水乙醇、70%乙醇、50%乙醇、甲醇）提取蓝莓花青素，选取最佳溶剂，探究超声辅助、微波辅助和超声-微波辅助技术对蓝莓花青素含量的影响，并对3种方法提取的花青素分别进行稳定性和抗氧化性分析。结果表明：无水乙醇的提取效果最好，超声-微波相对于单独采用超声或微波提取花青素的效率更高，花青素的最高提取含量为0.846 mg/g。抗氧化性分析结果表明：超声-微波协同提取的花青素对ABTS+自由基清除能力、对DPPH自由基清除率以及FRAP抗氧化能力略低于微波提取的花青素。稳定性分析结果表明：温度越高花青素的稳定性越差；pH值在3～6范围内，花青素稳定性随pH值的增大而减少。微波提取与超声-微波提取的花青素稳定性相对较好，更适合长时间保存。
关键词： 超声辅助提取 微波辅助提取 超声-微波辅助提取 花青素 抗氧化性 稳定性
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培养组学在动物肠道微生物应用的研究进展
《中国畜牧兽医 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：肠道微生物被称为动物的“隐藏免疫器官”,不仅能参与宿主代谢还能影响宿主的免疫系统，对维持机体健康至关重要。作者主要介绍了培养组学的发展历程及其对动物肠道微生物研究的重要意义、传统微生物培养方法和分子生物学方法在研究微生物时各自的优、缺点。培养组学是基于传统微生物培养方法同时采用多种培养条件进行微生物培养，再辅以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）和16S rRNA基因测序技术建立的一种新型微生物分离、鉴定方法，该方法将传统微生物培养技术与分子生物学技术的优点融为一体。该方法在挖掘“新微生物”的研究中，具有发现、找到并获得的优势；在微生物的研究中可定制分离目标菌株进行验证，并能通过丰富注释清楚地了解肠道微生物组。此外，分析了培养组学分别在家禽肠道、猪肠道、反刍动物肠道等动物肠道的研究应用现状，提出了环境条件对肠道微生物的影响，如人类接触对肠道菌群的影响、同物种不同性别肠道菌群的差异，以期为培养组学在动物肠道微生物的研究运用中提供参考。
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亚硒酸钠和酵母硒对蛋鸭产蛋性能、蛋品质、蛋硒含量和蛋硒转化率的影响
《动物营养学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究不同水平的亚硒酸钠（SS）和酵母硒（SY）对蛋鸭产蛋性能、蛋品质、蛋硒含量和蛋硒转化率的影响，探究其在鸭蛋中的富集和消去规律。选取540只健康、产蛋性能相近的44周龄龙岩山麻蛋鸭，随机分为9组，每组6个重复，每个重复10只鸭。试验期16周，分为富集期12周和消去期4周。富集期，各组分别饲喂基础饲粮（对照组，硒含量0.15 mg/kg）及在基础饲粮中分别添加0.3、0.6、0.9和1.2 mg/kg的SS或SY（以硒计）的试验饲粮。消去期，各组均饲喂基础饲粮。结果表明：1)富集期，与对照组相比，饲粮中添加SS和SY对产蛋率、平均蛋重、日产蛋量和料蛋比均无显著影响（P＞0.05），但显著提高了平均日采食量（第5～8周、第9～12周和第1～12周，P＜0.05）。消去期，与对照组相比，仅饲粮中添加SY显著提高了平均日采食量（第1～2周，P＜0.05）。2)与对照组相比，饲粮中添加SS和SY对蛋重、蛋形指数、蛋壳强度、蛋黄颜色、蛋壳重、蛋壳比例、蛋壳厚度均无显著影响（P＞0.05），但饲粮中添加SS显著降低了蛋白高度和哈氏单位（第2、4、12周和平均值，P＜0.05），饲粮中添加SY也显著降低了蛋白高度和哈氏单位（第12周和平均值，P＜0.05）。3)富集期，与对照组相比，第3、7、14、28、56和84天，饲粮中添加SS和SY均显著增加了蛋硒含量（P＜0.05），且SY显著高于SS（P＜0.05）。消去期，与对照组相比，第3和7天，饲粮中添加SS和SY显著增加了蛋硒含量（P＜0.05），且SY显著高于SS（P＜0.05）。4)富集期，与对照组相比，第3、7、28和56天，饲粮中添加SS和SY显著降低了蛋硒转化率（P＜0.05），且SY显著高于SS（P＜0.05）。消去期，与对照组相比，第3和7天，饲粮中添加SS和SY显著提高了蛋硒转化率（P＜0.05），且SY显著高于SS（P＜0.05）。5)利用线性回归模型拟合蛋硒含量，得出SY的蛋硒含量在富集期第3、7、14、28、56和84天分别是SS的4.418、3.819、4.381、4.290、4.276和4.380倍，消去期第3、7、14和21天分别是SS的4.201、4.208、32.10和12.17倍。6)以硒0.3 mg/kg添加水平，饲喂3 d，蛋硒含量分别为0.50（饲粮中添加SS）和0.72 mg/kg（饲粮中添加SY）。根据中国居民不同人群每日富硒鸭蛋推荐量，建议每天鸭蛋（约65 g）的摄入量分别为0.77～2.40个（饲粮中添加SS）和0.53～1.67个（饲粮中添加SY）。综上所述，饲粮中添加0.3～1.2 mg/kg的SS和SY提高了蛋鸭的平均日采食量，但降低了蛋白高度和哈氏单位，提高了蛋硒含量。与SS相比，SY在鸭蛋中的富集速度增加，消去速度降低。SY的蛋硒含量约是SS的4倍左右，蛋硒转化率也高于SS。
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