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食源性沙门氏菌Real-time PCR技术快速检测方法的建立及初步应用

文献类型： 中文期刊

作者： 李莉莉 1 ; 单宏 1 ; 张瑞英 1 ; 黄翠 1 ;

作者机构： 1.黑龙江省农业科学院农产品质量安全研究所/农业农村部农产品质量安全风险评估实验室（哈尔滨）

关键词： Real-time PCR;沙门氏菌;快速检测;初级农产品

期刊名称： 黑龙江农业科学

ISSN： 1002-2767

年卷期： 2020 年 012 期

页码： 93-98

摘要： 近年来分子生物学检测技术发展迅速,本研究通过优化建立了食源性沙门氏菌的Real-time PCR检测方法,并对其结果的特异性、灵敏度、重复性等进行验证,以及初级农产品添加实验的适用性和一致性进行比对。结果表明:优化后的Real-time PCR检测条件为:95℃,5min,95℃,30s;然后65℃,30s,72℃,30s,此步骤为40个循环;最后72℃,5min。总反应体系为20μL,其中上下游引物的添加量分别为1μL。建立的Real-time PCR快速检测方法特异性强,重复性好,灵敏度高而且不需要前增菌,较传统检测方法大大缩短了检测时间,整个试验操作过程可在6h内完成。将此方法应用于人工污染的初级农产品中沙门氏菌的检测,结果表明生鲜猪肉、即食蔬菜和即食水果样品中沙门氏菌的检测灵敏度均较高。通过与微生物传统计数方法的检测结果进行比较,结果显示与传统方法的一致性为100%,可用于食品中沙门氏菌的检测。

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