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联合策略优化犬α干扰素的酵母表达

文献类型: 中文期刊

作者: 李丁 1 ; 李兰 1 ; 安允飞 2 ; 毕振威 3 ; 于晓明 1 ; 陈瑾 1 ; 郑其升 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院动物免疫工程研究所

2.南京农业大学食品科技学院

3.江苏省农业科学院兽医研究所

关键词: 犬α干扰素;毕赤酵母;重组蛋白产量;多拷贝;分子伴侣

期刊名称: 中国生物工程杂志

ISSN: 1671-8135

年卷期: 2022 年 42 卷 001 期

页码: 88-95

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 前期研究在毕赤酵母中分泌表达了犬α干扰素(CaIFN),其活性较高但产量未达到理想水平.目前工作的重点是提高重组蛋白产量.构建含有1、2、4、6、8拷贝CaIFN基因的酵母转化子,其中KM-6CaIFN产量最高,与KM-1CaIFN相比提高了200.6%.共表达8种分子伴侣,其中Hac蛋白能够提高KM-6CaIFN和KM-8CaIFN的目的蛋白产量,提高幅度分别为32.1%和113.1%.在此基础上继续增加CaIFN拷贝数,可观察到KM-12CaIFN-Hac的产量最高,是KM-8CaIFN-Hac的1.33倍,同时是KM-1CaIFN的5.61倍.通过与梯度稀释的BSA进行蛋白质条带比较,评估KM-12CaIFN-Hac的靶蛋白产量约为581 mg/L,为目前报道中酵母产犬α干扰素最高值.

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