文献类型： 中文期刊

作者： 周敏 ¹ ; 冷凯良 ¹ ; 王致鹏 ¹ ; 苗钧魁 ¹ ; 刘小芳 ¹ ; 高华 ¹ ; 王海英 ¹ ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所农业农村部极地渔业重点实验室;青岛大学药学院;海洋国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室

关键词： 褐藻胶裂解酶;弧菌;鉴定;响应面分析;条件优化

期刊名称： 青岛大学学报(自然科学版)

ISSN： 1006-1037

年卷期： 2019 年 01 期

页码： 37-45

摘要： 为进一步探索高产褐藻胶裂解酶菌株,促进其工业化应用,以褐藻酸钠为唯一碳源筛选培养基,从鲍鱼内脏中筛选出一株高产褐藻胶裂解酶菌株B4,通过形态学观察和系统发育分析,鉴定为弧菌属细菌Vibrio sp.B4。通过单因素实验对B4菌株的发酵条件和发酵培养基进行优化,获得发酵培养基的最适碳源为褐藻酸钠10g/L,最适氮源为(NH4)2SO410g/L,最适发酵条件为温度30℃,接种量1%,培养基初始pH 6.0。在单因素实验的基础上,通过Plackett-Burman(PB)筛选出3个影响产酶活力的显著因素:(NH4)2SO4浓度、pH、接种量。通过响应面进一步分析优化,得到最佳的发酵培养基为褐藻酸钠10g/L,(NH_4)_2SO_4 10.91g/L,NaCl 10g/L,KH_2PO_4 1g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,CaCl_2 0.2g/L,FeSO_4·7H_2O 0.02g/L,最佳发酵条件为温度30℃,接种量1.1%,起始pH 6.07。在最佳培养条件下,褐藻胶裂解酶活力可达19.09U/mL,比基础培养条件下提高了3.67倍。该菌经过产酶发酵条件的优化,酶活力得到较大幅度的提高,且其发酵产酶时间短,可为褐藻胶裂解酶的进一步研究应用提供参考。