科研产出
五指山猪和长白猪断奶仔猪肠道免疫性能及微生物多样性比较分析
《中国畜牧兽医 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探讨早期断奶对五指山猪和长白猪小肠肠道免疫性能及微生物多样性的影响差异。【方法】选择生长发育及营养状况良好、28日龄断奶的长白猪与五指山猪各6头，于50日龄采集小肠各段组织、内容物、黏膜，依次采用石蜡切片(HE染色)、16S rDNA V3-V4区基因高通量测序、实时荧光定量PCR测定，比较两品种间肠道形态学、肠道菌群及肠道黏膜免疫相关基因mRNA相对表达量的差异。【结果】(1)五指山猪空肠绒毛高度显著低于长白猪(P<0.05)。(2)长白猪十二指肠与回肠微生物多样性均较五指山猪更丰富(P<0.05)。(3)在门水平上，五指山猪空肠、回肠中厚壁菌门(Firmicutes)的丰度均显著高于长白猪，但变形菌门(Proteobacteria)出现相反的表达趋势(P<0.05)。在属水平上，五指山猪回肠中乳杆菌属(Lactobacillus)的丰度显著高于长白猪(P<0.05)。(4)黏膜免疫相关基因表达量的检测结果显示，长白猪十二指肠中抑炎因子白细胞介素10(IL-10)和紧密连接蛋白闭锁小带蛋白1(ZO1)的mRNA表达量均显著高于五指山猪(P<0.05);而空肠与回肠中促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达量均显著低于五指山猪(P<0.05)。【结论】与长白猪相比，早期断奶后五指山猪小肠肠道免疫性能及微生物多样性较差，可适当延长五指山猪的断奶日龄来减少仔猪腹泻率，以保证断奶仔猪的成活率。
关键词： 五指山猪 长白猪 早期断奶 免疫性能 肠道微生物多样性
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槟榔生物碱致癌性、致口腔黏膜下纤维化及兴奋作用等活性研究进展
《食品与发酵工业 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：槟榔是棕榈科植物槟榔的果实,是海南农业经济的重要支柱产业.生物碱是槟榔中重要的生物活性物质,与嚼食槟榔引起的神经兴奋作用密切相关.槟榔中生物碱种类众多,各生物碱含量、结构、作用也不尽相同,生物碱的含量与槟榔产品的成瘾性和致癌性密切相关.槟榔生物碱同时具有促进胃肠道消化、驱虫、抑菌、抗抑郁等的正面及致癌性、致口腔黏膜下纤维化、生殖系统毒性等的负面效应.该文系统全面地概述了目前研究报道的槟榔生物碱的种类结构、生物碱形成亚硝胺衍生物的代谢途径及致癌性研究进展、生物碱致口腔黏膜下纤维化及兴奋作用的分子机制以及槟榔生物碱在心血管系统、消化系统、生殖系统等系统中发挥的作用,以期为槟榔生物碱的深入研究提供理论指导.
关键词： 槟榔生物碱 生物活性 致癌性 口腔黏膜下纤维化 兴奋性
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海南油茶SCoT反应体系建立与多态性引物筛选
《分子植物育种 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：SCoT-PCR是一种单引物扩增分子标记.为了将SCoT分子标记应用于海南油茶的分子鉴定和遗传多样性评价中,本研究采用单因素试验和正交试验结合方法,分析模板DNA、dNTPs、TaqDNA聚合酶及引物4种因素对海南油茶SCoT-PCR扩增结果的影响,构建海南油茶SCoT-PCR体系,并筛选多态性引物.单因素试验结果表明:DNA浓度对海南油茶扩增效率影响不大,高浓度dNTPs利于扩增产物,而Taq酶和引物扩增高效率偏于中浓度.正交试验结果表明:各因素对海南油茶SCoT-PCR扩增影响大小依次为引物>TaqDNA聚合酶>dNTPs>模板DNA;总体系为20 μL时,最佳反应体系中模板DNA用量为30 ng,dNTPs浓度为0.30 mmol/L,引物浓度为0.60 μmol/L,Taq DNA聚合酶用量为1.00 U.利用构建的SCoT-pcr体系对80条SCoT单引物进行筛选,最终筛选出16条SCoT条带清晰的多态性引物,多态性比率平均值达到76.25%.本试验结果可为海南油茶的遗传多样性分析和种质资源鉴定等研究提供参考数据.
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基于猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF2a基因的RT-RAA-LF检测方法的建立
《中国兽医科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：本研究针对猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF2a基因序列，设计特异性RAA引物和标记探针，通过反转录酶与重组酶扩增结合，旨在建立一种高效检测PRRSV的基于侧流层析试纸条的可视化RT-RAA方法。结果，建立的RT-RAA-LF方法的最佳反应条件是39℃恒温扩增10 min，可在2 min内实现对检测结果的可视化判定；该方法特异性强，仅对PRRSV出现阳性扩增，对本研究中其他病原均无交叉反应；以含PRRSV ORF2a基因全段序列的重组质粒作为模板，RT-RAA-LF的检出限为160 copies/μL。应用建立的RT-RAA-LF方法对临床采集的160份样本进行检测，与PCR方法进行比较，两种方法的符合率为96.8%（65/68），一致性检验为χ~2＜3.84，在95%的置信区间内没有显著性差异，当中3份临床样品在PCR检测中为阴性。综上，基于PRRSV ORF2a建立的RT-RAA-LF方法操作简单，对仪器设备要求不高，能够高效且直观的实现临床检测，满足现场检测的要求，对猪养殖场快速诊断和防控PRRSV具有重要意义。
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF2a 侧流层析试纸条 重组酶介导扩增法（RAA） 临床检测
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枯草芽孢杆菌Ya-1对辣椒枯萎病的防治及其对根际真菌群落的影响
《生物技术通报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：探究生防菌枯草芽孢杆菌Ya-1对辣椒枯萎病的防治效果，及对辣椒受尖孢镰刀菌侵染后根际真菌群落和多样性的影响。以枯草芽孢杆菌Ya-1为接种菌，探究了枯草芽孢杆菌Ya-1对辣椒枯萎病的防治效果，并通过高通量测序研究了接种前，接种后10 d,20 d时受尖孢镰刀菌侵染后辣椒根际真菌群落变化。与FOC处理（C）相比，Ya-1+FOC（D）在第10天和第20天的相对防治效果分别为77.93%和77.26%。同时接种枯草芽孢杆菌Ya-1和辣椒枯萎病菌组真菌α多样性在10 d和20 d时真菌香农指数均高于接种辣椒枯萎病菌组。在进行处理后真菌群落组成发生了显著变化，同一时间点处理组和对照组真菌群落具有显著差异，接种辣椒枯萎病菌组和同时接种辣椒枯萎病菌和枯草芽孢杆菌Ya-1组也具有显著差异（P ＜0.05）。各处理土壤优势真菌种群分别为子囊菌门、接合菌门、担子菌门。在10 d和20 d，接种病原菌（OTU＿1）相对丰度在接种辣椒枯萎病原菌组和同时接种辣椒枯萎病菌组和枯草芽孢杆菌Ya-1组间具有显著差异，相比较接种辣椒枯萎病原菌组，OTU＿1相对丰度降低，被孢霉菌（Mortierella）的相对丰度升高。相比较对照组，接种辣椒枯萎病菌处理后连接数减少，而在加入枯草芽孢杆菌Ya-1处理后，正连接数降低。枯草芽孢杆菌Ya-1处理对辣椒枯萎病有较好的防治效果，同时它也改变了接种病原菌辣椒根际真菌群落多样性和结构，降低了真菌群落的复杂度和根际土壤中病原菌的丰度。
关键词： 枯草芽孢杆菌 辣椒枯萎病 微生物群落 辣椒 根际 真菌
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海南辣椒尖孢镰刀菌拮抗内生细菌的分离与鉴定
《分子植物育种 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为了获得对辣椒尖孢镰刀菌具有较好防治效果的内生细菌,课题组于2022年1~3月份在海口、定安、澄迈、临高和陵水等海南辣椒主产区采样,并从健康辣椒样品中分离获得内生细菌192株,其中39株对辣椒尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)CMTT4-1有拮抗作用,分别来源于根系(23株)、茎秆(2株)、叶片(8株)和果实(6株),有拮抗作用菌株占比20.31%,抑菌率为10.68%~59.02%.通过形态学和16SrDNA序列测定及同源性分析,初步鉴定芽孢杆菌属(Bacillus spp.)细菌36株、短杆菌属(Brevibacterium spp.)1株、农杆菌属(Agrobac-terium spp.)1株和假单胞菌属(Pseudomonas spp.)1株.研究结果为辣椒枯萎病的生物防治提供了菌株来源.
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植物激素对组织培养闭鞘姜种子苗繁殖系数的影响
《分子植物育种 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为建立闭鞘姜种子快速高效繁殖技术体系,以闭鞘姜种子为试验材料,通过不同浓度激素搭配比例,开展闭鞘姜种子诱导萌发和不定芽诱导生长试验,研究了种子芽增值系数、生根率、根数、根长和株高等指标.结果表明:不同浓度激素搭配比例对种子芽的诱导和芽增殖以及根系的生长发育具有显著的影响,其中种子在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基中适宜种子诱导出芽,其增值系数为5.77;培养基MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L 有利于芽增殖,增殖系数达到 7.23;培养基 MS+NAA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L适宜生根壮苗,生根率达99.26%,根数为5.53条.该研究结果将为闭鞘姜规模化繁育种苗提供一定的技术支撑.
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荔枝多胺氧化酶(PAO)基因家族的全基因组鉴定与表达分析
《分子植物育种 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为了探究PAO基因在荔枝（Litchi chinensis Sonn.）生长发育过程中的生物学功能，本研究基于荔枝全基因组数据，利用生物信息学方法筛选与鉴定荔枝PAO基因（LcPAO）成员，并对其理化性质、系统发育、结构、染色体定位、顺式作用元件、蛋白结构、miRNA靶位点和表达模式进行了分析。结果表明，一共鉴定得到10个LcPAO基因，全部为亲水蛋白。系统发育分析发现LcPAO落在4个亚族中的Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ亚族。LcPAO1～LcPAO3和LcPAO9～LcPAO10属于典型的PAO蛋白，LcPAO4～LcPAO8还含有一个特异的SWIRM结构域，属于非典型PAO蛋白。顺式作用元件分析表明其主要含光响应元件、逆境胁迫相关元件以及激素响应相关元件。miRNA靶位点分析发现LcPAO基因受到22个miRNAs的靶向调控。转录组表达模式分析发现，除了LcPAO1和LcPAO4，余下的LcPAO基因可能与荔枝果皮着色相关。所有的LcPAO基因均可能与荔枝的化学控花相关。除了LcPAO1所有的LcPAO基因均可能与荔枝果实脱落相关。本研究为深入研究LcPAO基因的功能和调控机制提供参考。
关键词： 荔枝 多胺氧化酶（PAO） 生物信息学 表达分析
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