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枸杞实时荧光定量RT-qPCR内参基因筛选与验证

江苏农业科学 2023 北大核心

摘要:以9种不同基因型枸杞的不同组织(茎、叶、花、果)和不同发育期(FS1~FS5)的果实为试材,选取Act-1/Act-3、Ef1a、Gapdh、H3b、Acx4、Pp2a、Rh37、Samc、Tub为候选内参基因,利用实时荧光定量技术(RT-qPCR)检测了9个候选基因在不同基因型枸杞的不同组织和不同发育阶段果实中的表达水平。并采用geNorm、NormFinder、BestKeeper、Delta Ct、RefFinder分析方法,评估候选内参基因的表达稳定性,并选择Beat基因验证内参基因。结果表明,Ef1a为不同基因型枸杞的不同组织和5个发育时期果实中表达较稳定的内参基因,Gapdh为表达最不稳定的内参基因;在宁夏枸杞中表达最稳定的内参基因为Rh37,其次为Ef1a。进一步采用Beat基因对不同基因型枸杞的不同组织(茎、叶、花、果)和5个发育时期果实中的表达模式进行验证,表明Ef1a、Act-1基因可作为枸杞稳定的内参基因。

关键词: 枸杞 内参基因 实时荧光定量PCR 定量分析

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滩羊C1H3orf33和CNV14基因拷贝数变异与生长性状的关联研究

中国畜牧杂志 2023 北大核心 CSCD

摘要:实验旨在研究C3orf33同源基因(C1H3orf33)和拷贝数14基因(CNV14)拷贝数变异对滩羊生长性状的影响,采用CNVplex检测试剂盒对宁夏地区150只滩羊1号染色体C3orf33同源基因(C1H3orf33)的拷贝数变异(CNV)进行分析并探讨其与生长性状之间的相关关系。结果表明:C1H3orf33基因CNV与滩羊的体重、体高、体长、胸围和管围显著相关,CNV14区域与体重、体高和体长显著相关,系统进化树显示,C1H3orf33基因与人类及其他哺乳动物的同源基因高度相似,说明C1H3orf33基因可能在转录调控中发挥重要作用,CNV14区域可能是绵羊育种中标记辅助选择(MAS)的候选位点。

关键词: 滩羊 C1H3orf33 CNV14 拷贝数变异 生长性状

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不同水氮配比对甘草生长、水分利用效率和类黄酮含量的影响

植物生理学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:为研究不同水氮配比对甘草生长的影响,以乌拉尔甘草为研究对象,采用裂区试验设计,以4种灌水量为主区,4个氮肥水平为副区,研究水、氮因子及其组合对甘草净光合速率、叶绿素荧光参数、叶绿素SPAD值、地上部干物质积累量,水分利用效率及叶片类黄酮含量的影响。结果表明:灌溉对净光合速率、最大荧光、最大光化学效率、叶绿素SPAD值、地上部干物质积累量、水分利用效率及类黄酮含量影响极显著;施用氮肥对净光合速率、最大荧光、最大光化学效率、叶绿素SPAD值和类黄酮含量影响极显著,对初始荧光、地上部干物质积累量和水分利用效率影响显著;水氮交互作用对净光合速率影响极显著,对叶绿素SPAD值和水分利用效率影响显著。相比于W1N1(灌溉定额750 m~3·hm–2,不施氮),W4N3(灌溉定额3 000 m~3·hm–2,氮肥施量140 kg·hm–2)的净光合速率、最大荧光、最大光化学效率、叶绿素SPAD值、地上部干物质积累量和类黄酮含量分别提高了18.1%、29.9%、26.4%、17.7%、24.8%和32.1%,初始荧光降低了6.7%,表明灌溉定额3 000 m~3·hm–2,施氮量140 kg·hm–2的处理有利于提高甘草的光合效率,增加叶绿素含量及干物质积累量,提高叶片类黄酮含量。相关性分析表明,净光合速率、最大荧光、最大光化学效率和叶绿素SPAD值均与甘草地上部干物质积累量及叶片类黄酮含量呈极显著正相关,与水分利用效率呈极显著负相关。

关键词: 甘草 水氮 生长 叶绿素 类黄酮

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日粮精粗比对哺乳期犊牛生长性能、瘤胃发酵参数及细菌菌群结构的影响

饲料研究 2023 北大核心

摘要:试验旨在研究日粮精粗比对哺乳期犊牛生长发育、瘤胃发酵参数及细菌菌群结构的影响。选择30头出生1周左右、体重(33.00±1.5) kg的健康安格斯犊牛(公、母各半),随机分为3组,每组10个重复,每个重复1头牛。试验1组、试验2组、试验3组日粮精粗比分别为60∶40、50∶50、40∶60。犊牛7 d开始补饲颗粒料,预试期10 d,正式试验期90 d。结果表明,试验1组犊牛90日龄体重、采食量、平均日采食量、平均日增重均极显著高于试验3组(P<0.01),料重比显著高于试验2组、试验3组(P<0.05);试验1组微生物蛋白、氨态氮、异丁酸含量极显著高于试验2组、试验3组(P<0.01),乙酸和丁酸含量显著高于试验3组(P<0.05)。试验1组的犊牛OTU极显著高于试验2和试验3组(P<0.01)。试验1组瘤胃拟杆菌门、后壁菌门、黏胶球形菌门、螺旋菌门、纤维杆菌门的含量均极显著低于试验3组(P<0.01)。试验1组犊牛瘤胃密螺旋体属、螺旋菌属、丁酸弧菌_2属的丰度极显著高于试验2组、试验3组(P<0.01)。研究表明,高精粗比饲粮可提高犊牛采食量、平均日增重和料重比,对犊牛早期增重有益,且瘤胃发酵指标优于其他试验组,在门水平上瘤胃细菌变化最为明显,促进了瘤胃发酵,建议哺乳期犊牛饲喂日粮精粗比为60∶40。

关键词: 精粗比 犊牛 生长性能 瘤胃发酵参数 菌群结构

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宁夏地区腹泻犊牛产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希氏菌的药敏试验及脉冲场凝胶电泳分型

动物医学进展 2023 北大核心 CSCD

摘要:为了解宁夏地区规模化牛场犊牛腹泻源产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希氏菌耐药和遗传变异情况,对分离得到的17株产ESBLs大肠埃希氏菌,采用K-B纸片法进行药物敏感性试验,采用脉冲场凝胶电泳进行分型研究。结果显示,17株分离株对试验药物多数呈耐药状态,对头孢拉定、四环素、阿莫西林3种药物完全耐药,其他药物的耐药性为70.24%~94.12%,只对阿米卡星、诺氟沙星敏感性较高。分离菌株可分为17个PFGE型,菌株间的相似度为67.5%~85.7%,无优势带型。宁夏地区犊牛腹泻源产ESBLs大肠埃希氏菌耐药性严重,遗传差异较大,但不同菌株存在着不同程度的亲缘关系。

关键词: 犊牛 超广谱β-内酰胺酶 大肠埃希氏菌 脉冲场凝胶电泳分型

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溴氰虫酰胺在枸杞果实中的残留及消解动态

农药 2023 北大核心 CSCD

摘要:[目的]研究溴氰虫酰胺在枸杞果实上的残留及消解动态,为药剂在生产中推广应用提供科学依据。[方法]参照《农药残留试验准则》进行溴氰虫酰胺田间消解动态试验,样品经乙腈提取,采用高效液相色谱-串联质谱进行检测。[结果]溴氰虫酰胺在5.0~100.0μg/L的质量浓度范围内呈良好的线性关系(R~2=0.9980)。添加质量分数在0.01~5.0 mg/kg范围内,枸杞鲜果中溴氰虫酰胺的平均回收率为87.1%~108.7%,相对标准偏差为1.5%~2.5%,方法检出限为0.003 mg/kg;枸杞干果中溴氰虫酰胺的平均回收率为90.5%~100.1%,相对标准偏差为1.3%~2.8%,方法检出限为0.010 mg/kg。溴氰虫酰胺在枸杞果实中的残留消解动态符合一级动力学方程,其半衰期为1.24~2.39 d。[结论]建议生产中以10%溴氰虫酰胺OD 50 mg a.i./kg防治枸杞害虫,施药次数为1、2次时,采收安全间隔期分别不低于7、14 d;以100 mg a.i./kg防治时,施药次数为1次,采收安全间隔期不低于20 d,药剂的残留标准可达到食品安全及膳食摄入风险要求。

关键词: 溴氰虫酰胺 枸杞 残留 消解动态

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桃儿七愈伤组织中体细胞胚起源过程的组织细胞学观察

分子植物育种 2023 北大核心 CSCD

摘要:以桃儿七(Sinopodophyllum emodi (Wall.) Ying)实生苗下胚轴为外植体进行了桃儿七体细胞胚诱导,并对体细胞胚诱导不同时期的培养物进行了形态学与组织细胞学观察。结果表明:将非胚性愈伤组织转入到MS+0.5 mg/L 6-BA+0.15 mg/L NAA+0.1 mg/L GA3+300 mg/L CH+40.0 g/L sucrose上后愈伤组织逐步分化出一些胚性愈伤组织,胚性愈伤组织转入到MS+6-BA 1.0 mg/L+TDZ 0.1 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养及分化后,愈伤组织表层的胚性细胞逐步分裂形成由多细胞组成的原胚组织,原胚细胞分生能力较强,不断生长,由长椭圆形发展至倒卵形,最后逐渐形成近球形的球形胚。与此同时,胚性愈伤组织内部也不断出现细胞分化,逐渐形成球形胚结构,内部起源于胚性愈伤组织的体细胞胚胎容易出现停止发育的情况,导致畸形胚发生,制约了桃儿七体细胞胚再生苗的形成。本研究发现,桃儿七体细胞胚发生具有内起源和外起源2种方式,且愈伤组织中体细胞胚发生还存在不同步、不均匀等现象,为后期桃儿七体细胞胚途径再生苗的培育提供了基础。

关键词: 桃儿七 体细胞胚 起源方式 组织细胞学

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规模舍饲羊场羊消化道及环境寄生虫情况调查

中国畜牧兽医 2023 北大核心 CSCD

摘要:【目的】调查规模化舍饲羊场及散养羊消化道感染及环境污染寄生虫情况,为中国规模舍饲羊场羊消化道寄生虫综合防控提供参考。【方法】采用离心沉淀法、卢戈氏碘液染色法和饱和蔗糖溶液漂浮法等技术,对采自河南和宁夏的4个规模舍饲羊场及12个散养户的1 025份羊粪便样品寄生虫感染和712份环境样品寄生虫污染情况进行检查,采用麦克马斯特法计数球虫阳性样品每克粪便中的球虫卵囊数(OPG)。选择汝州规模舍饲羊场进行季节动态调查,了解不同季节规模舍饲羊场羊消化道感染及环境污染寄生虫情况。【结果】羊消化道寄生虫总感染率为82.83%(849/1 025),共检出8种(类)寄生虫,分别为球虫、阿米巴、贾第虫、隐孢子虫、绦虫、鞭虫、细颈线虫和其他线虫。优势虫种为球虫(71.90%),其次为阿米巴(49.07%),球虫与阿米巴较易发生混合感染。环境样品寄生虫总阳性率为38.48%(274/712),共检出6种(类)寄生虫,包括球虫、阿米巴、贾第虫、鞭虫、细颈线虫和其他线虫,优势虫种是线虫(22.75%)。河南规模舍饲羊场羊消化道寄生虫感染率以及环境样品寄生虫检出率均显著低于宁夏规模舍饲羊场(P<0.05)。舍饲羊与散养放牧羊相比,感染的虫种更少、感染率更低;哺乳羔羊消化道寄生虫感染率显著低于其他生理阶段(P<0.05);在汝州规模舍饲羊场中,冬季羊消化道寄生虫感染率显著低于其他季节(P<0.05),哺乳羔羊球虫感染率最低(14.95%),但感染强度最大(平均OPG为105 203);育肥期羔羊的感染率最高(88.99%)。【结论】规模化舍饲羊场羊消化道寄生虫感染率较高,球虫和阿米巴混合感染较普遍,环境寄生虫污染严重,应加强卫生措施,防止环境寄生虫污染及病原散播,做好计划性驱虫。

关键词: 规模舍饲羊场 消化道寄生虫 环境污染 感染率

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娃娃菜不同轮作模式下根际土壤微生物群落多样性特征

干旱地区农业研究 2023 北大核心 CSCD

摘要:为探明不同作物与娃娃菜轮作后的效果,在宁夏南部山区进行定位试验,采用高通量测序技术,结合土壤理化性质及酶活性,比较分析了娃娃菜-西兰花(CMB)、娃娃菜-大葱(CMG)、娃娃菜-洋葱(CMO)、娃娃菜-土豆(CMP)和以娃娃菜连作(CCC)为对照的5个处理的微生物多样性,旨在筛选出适宜与娃娃菜轮作的作物,为从栽培模式选择角度缓解或避免娃娃菜连作障碍提供理论依据。试验结果表明:与连作相比,轮作马铃薯土壤硝态氮含量最高为12.8 mg·kg-1,轮作大葱土壤速效磷含量最高为75.74 mg·kg-1,但不同轮作模式下速效钾和有机质含量有所下降。轮作马铃薯土壤的碱性磷酸酶、蔗糖酶与轮作洋葱土壤的过氧化氢酶、脲酶显著低于娃娃菜连作和轮作其他作物。细菌丰度在属水平上的结果表明轮作导致大部分有益细菌属丰度升高,如贪铜菌属(Cupriavidus)、鞘脂单胞菌属(Sphingomonas)、柄杆菌属(Caulobacter)等,有害菌及其他部分未分类功能作用菌属丰度降低,如伯克氏菌(Burkholderiaceae)、黄杆菌属(Flavobacterium)等。真菌群落组成研究结果显示,子囊菌门(Ascomycota)是连作与轮作模式下共有的优势菌群,同时轮作洋葱CMO和轮作马铃薯CMP中多真菌属丰度最低且与连作CCC之间存在显著差异。冗余分析表明,土壤硝态氮是改变娃娃菜连作与不同轮作模式下细菌和真菌群落结构的最重要因素。综上所述,不同作物与娃娃菜轮作会造成土壤化学性质、酶学性质及微生物多样性的改变,其中以洋葱与马铃薯在各方面指标中表现效果最佳,建议宁夏南部山区冷凉蔬菜产业中将娃娃菜-洋葱和娃娃菜-马铃薯作为主要的轮作模式进行推广。

关键词: 娃娃菜 轮作模式 根际土壤 微生物群落多样性 宁夏

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不同灵芝菌株发酵小麦秸秆对纤维降解及营养成分变化的影响

动物营养学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:本试验旨在研究不同灵芝菌株发酵小麦秸秆对纤维降解及营养成分变化的影响。试验组选用泰山赤芝(G1组)、韩芝(G2组)、紫灵芝(G3组)和红灵芝(G4组)发酵处理小麦秸秆,对照组(CON组)小麦秸秆不接种菌株,每个处理3个重复。于23℃下避光培养48 d后测定发酵底物中各种营养成分含量,筛选发酵效果最优菌株。结果表明:1)与CON组比较,灵芝真菌发酵小麦秸秆可显著降低pH及乙酸、干物质、酸不溶木质素、粗纤维、中性洗涤纤维和半纤维素含量(P<0.05),显著提高粗蛋白质、粗灰分(G1组除外)、钙、磷和氨基酸含量(P<0.05),对乳酸和酸性洗涤纤维含量无显著影响(P>0.05)。2)各菌株间比较,G1组的pH显著低于G4组(P<0.05),乙酸含量显著高于G3和G4组(P<0.05),精氨酸含量显著高于G4组(P<0.05),干物质含量极著高于G4组(P<0.01),粗脂肪含量极著高于G2、G3和G4组(P<0.01),中性洗涤纤维含量显著低于G3组(P<0.05),半纤维素含量极显著低于G3组(P<0.01);G3组的粗灰分含量显著高于G1组(P<0.05),粗纤维含量极显著低于G4组(P<0.01);霉菌、丙酸和丁酸含量在各组中均未检出。综上所述,灵芝真菌能够有效降解小麦秸秆的纤维物质,提高其营养价值;其中,泰山赤芝菌株的发酵效果最优。

关键词: 灵芝真菌 小麦秸秆 纤维素 营养成分

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